RNA干擾（基因沉默）

項目內(nèi)容概述
RNA干擾(RNAi，RNA Interference)是抵御外來病毒侵犯的一種防御機制，廣泛應(yīng)用于功能基因組學(xué)、基因治療、靶藥物篩選、細胞信號通路分析、蛋白質(zhì)互作等領(lǐng)域。具體來說，當(dāng)dsRNA或pre-miRNA進入細胞后，能夠被特異的核酸內(nèi)切酶（Dicer）識別并切割成為很小的片段，這些片段在解旋酶的作用下會解鏈。反義鏈在與體內(nèi)一些酶結(jié)合形成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物（RNA-Induced Silencing Complex，RISC），RISC與mRNA同源區(qū)進行特異性結(jié)合，若miRNA與mRNA的結(jié)合位點能夠*配對，則會切割mRNA；若miRNA與mRNA的結(jié)合位點不能夠*配對，則會抑制mRNA的翻譯過程。
目前實驗中主要采用miRNA、 shRNA 和siRNA 3種RNA干擾方法。shRNA是利用人源或鼠源的RNA聚合酶III（pol III）啟動子，對編碼短干擾RNA（siRNA）的DNA序列進行轉(zhuǎn)錄來實現(xiàn)RNA干擾。轉(zhuǎn)錄后的shRNA經(jīng)加工，參與RISC的形成。與人工合成的siRNA相比，shRNA可以在較長時間內(nèi)有效抑制細胞內(nèi)靶基因的表達。miRNA是一類可以通過RNAi機制調(diào)節(jié)基因表達的內(nèi)源性小RNA，人工miRNA與shRNA的設(shè)計原理基本相同，由于miRNA具有內(nèi)源性，因此其更易產(chǎn)生有效的基因沉默。
我們擁有一系列shRNA/miRNA表達載體以及Sponge載體，同時提供包括shRNA/miRNA設(shè)計、慢病毒包裝、陽性克隆鑒定、單克隆培養(yǎng)、基因沉默細胞系構(gòu)建等一系列實驗服務(wù)內(nèi)容。

 
實驗流程
1、細胞預(yù)實驗。
2、慢病毒載體構(gòu)建。
3、shRNA/miRNA功能驗證。
4、慢病毒包裝。
5、RNAi細胞系構(gòu)建。
6、沉默效果檢測。

  
我們的優(yōu)勢
1、提供各種實驗材料和儀器，滿足項目課題實驗需要。
2、專業(yè)的操作人員。
3、高規(guī)格實驗室。
4、數(shù)據(jù)結(jié)果交付周期快。
5、*的服務(wù)體系，全程跟進，確保滿意。
服務(wù)流程
1、提交項目課題相關(guān)需求和資料。
2、與我們的專業(yè)技術(shù)團隊討論項目細節(jié)。
3、根據(jù)討論后的意見對實驗方案進行修改。 
4、雙方均滿意并達成一致，簽訂技術(shù)服務(wù)合同。
5、開展實驗，按期完成合同規(guī)定的內(nèi)容。
6、結(jié)題，提供實驗原始結(jié)果和分析結(jié)果、實驗流程、實驗條件等等。
咨詢與訂購 
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