什么是文庫構(gòu)建？

基于NGS測序的諸多優(yōu)點(diǎn)，故此技術(shù)在全球測序市場上占有著絕對的優(yōu)勢位置，而新一代測序（NGS）文庫制備是一體化測序流程中的一個關(guān)鍵因素，那么什么是文庫構(gòu)建呢？讓我們一起來看看吧！

基因文庫是儲存了某種生物的DNA片段的受體菌的集合體。文庫分為儲存全部DNA片段和部分DNA片段，前者叫基因組文庫，后者包括cDNA文庫。

文庫構(gòu)建的基礎(chǔ)是將目標(biāo)RNA或DNA制備成可以和測序儀器兼容的形式。從組織或者細(xì)胞中將DNA或RNA提取出來，并通過機(jī)械破碎或者是酶切法對其進(jìn)行片段化。如果前面提取的是RNA樣本，則需要將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。對DNA進(jìn)行接頭的連接后，一般還會有一個文庫的擴(kuò)增，即通過PCR來對所需的目的片段進(jìn)行擴(kuò)增，然后進(jìn)行上機(jī)測序。

傳統(tǒng)的DNA文庫構(gòu)建包括：DNA片段化（超聲法）、末端修復(fù)、加A、接頭連接和PCR文庫擴(kuò)增等過程（Figure 1）。整個實驗對DNA起始量、儀器有一定的要求。

新型的文庫構(gòu)建方法利用轉(zhuǎn)座酶的轉(zhuǎn)座原理，對DNA進(jìn)行片段化并同時加上部分接頭序列，是建庫過程中是一個重大的進(jìn)步。

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