凱杰qiagen糞便DNA提取試劑盒51804實驗步驟

一、凱杰qiagen糞便DNA提取試劑盒51804簡介

QIAamp Power Fecal Pro DNA Kit在PowerFecal原有技術的基礎上，采用新型微球管和優化的化學成分，可更高效地裂解細菌和真菌。抑制劑的去除已經簡化，使研究人員能夠更快地從糞便和腸道樣本中消除具有挑戰性的抑制劑。這導致總 DNA 通過在下游測試中觀察到的操作分類單元 （OTU） 揭示更高的 α 多樣性。采用簡化的抑制劑去除技術（Inhibitor Removal Technology，IRT），在去除抑制劑方面效率高，同時還能縮短樣品處理時間。QIAamp PowerFecal Pro DNA試劑盒的A260/A280比值也最高，接近1.8，表明其不含抑制劑。使用QIAamp PowerFecal Pro DNA Kits處理的樣品之間的變異性也較小。與第一代QIAamp PowerFecal Pro DNA Kit和其他市售試劑盒相比，使用QIAamp PowerFecal Pro DNA Kit的研究人員可以從糞便樣本中鑒定出更大的細菌多樣性和OTU數。

二、凱杰qiagen糞便DNA提取試劑盒51804實驗步驟

1.稱取200ul樣品在2ml的離心管中，離心管放在冰上。

2.每個樣品添加1mlInhibitEXBuffer,然后持續旋渦混合1min或者直到樣品混合均勻。

3.在70℃加熱懸浮液5min(難以溶解的細胞溶解溫度可以提高到95℃),然后旋渦混合15s。

4.離心樣品1min析出沉淀。

5.另取1.5ml離心管加15ulProteinaseK。

6.移取200ul步驟4的上清液至1.5ml含ProteinaseK的離心管中。

7.然后添加200ulBufferAL,旋渦混合15s。(注意：不要直接添加ProteinaseK到BufferAL中，樣品和BufferAL必須充分混合成均勻混合液)

8.70℃孵育10min。

9.添加200u1乙醇到溶解液中，旋渦混合。

10.小心移取600ul步驟9的裂解液到QIAamp旋轉柱中，蓋上蓋子，離心1min。

把QIAamp旋轉柱放到一個新的2ml的收集管中，丟掉含有濾液的管。11.小心打開QIAamp旋轉柱，添加500ulBufferAW1,離心1min。把QIAamp旋轉柱放到一個新的2ml收集管中，丟掉包含濾液的收集管。

12.小心打開QIAamp旋轉柱，添加500ulBufferAW2,離心3min,丟掉包含濾液的收集管。

13.把QIAamp旋轉柱放到一個新的2ml的收集管中，丟掉舊的含有濾液的收集管，離心3min。

14.把QIAamp旋轉柱放到一個新的1.5ml的離心管，直接移取200ulBufferATE

到QIAamp薄膜上。室溫孵育1min,然后離心1min洗提DNA。通過UV吸收度判斷DNA純度，使用BufferATE做空白設計避免結果錯誤。

三、凱杰qiagen糞便DNA提取試劑盒51804注意事項

1.準備好70℃水浴鍋。

2.所有的離心操作都在室溫下(15-25℃),14000轉/分鐘

3.用BufferAL和InhibitEXBuffer溶解任何沉淀都要加熱和混勻。

4.Buffer AW1和Buffer AW2都加乙醇。

5.使用之前混合所有緩沖液。

四、凱杰qiagen糞便DNA提取試劑盒51804規格表

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