賽默飛BCA蛋白定量試劑盒說(shuō)明書

一、 核心優(yōu)勢(shì)：為什么選擇賽默飛的BCA試劑盒？

與傳統(tǒng)的Bradford法或Lowry法相比，賽默飛的BCA試劑盒具備多項(xiàng)滿足現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室需求的突出優(yōu)勢(shì)：

1. 更廣泛的兼容性：對(duì)樣品中常見濃度的去垢劑（如SDS、Triton X-100） 和還原劑（如DTT、β-巰基乙醇） 具有更強(qiáng)的耐受性，顯著減少了樣品制備帶來(lái)的干擾。

2. 更高的靈敏度與更寬的線性范圍：檢測(cè)范圍通常可達(dá)20-2000 μg/mL，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性優(yōu)異（R² > 0.99），既能檢測(cè)微量樣品，也能準(zhǔn)確定量高濃度樣本，無(wú)需頻繁稀釋。

3. 出色的穩(wěn)定性：顯色反應(yīng)完成后，吸光度在室溫下可穩(wěn)定數(shù)小時(shí)，特別適合高通量96孔板操作，無(wú)需緊張地即時(shí)讀數(shù)。

4. 靈活的操作形式：提供微孔板法和試管法兩種標(biāo)準(zhǔn)操作程序，適配不同通量和儀器需求。

二、 產(chǎn)品核心信息與實(shí)驗(yàn)方案

賽默飛提供多種規(guī)格的BCA試劑盒（如貨號(hào)23225、23227等），經(jīng)典套裝通常包含以下組分：

標(biāo)準(zhǔn)操作流程（微孔板法）：

工作液配制：按50:1的體積比混合試劑A與試劑B，充分混勻。此工作液室溫下可穩(wěn)定24小時(shí)。

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：用與樣品相同的緩沖液，將蛋白標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋為一系列已知濃度（如0, 125, 250, 500, 750, 1000, 1500, 2000 μg/mL）。

加樣與反應(yīng)：在微孔板中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品（通常25 μL），再加入200 μL BCA工作液，輕輕震蕩混勻。

孵育與測(cè)定：蓋上板蓋，于37°C孵育30分鐘，或60°C孵育15分鐘（高溫可提高靈敏度）。隨后在酶標(biāo)儀上測(cè)定562 nm處的吸光度值。

計(jì)算濃度：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品吸光度值，計(jì)算未知樣品的蛋白濃度。

三、 關(guān)鍵技巧與注意事項(xiàng)

為了獲得可靠的數(shù)據(jù)，以下幾點(diǎn)至關(guān)重要：

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線是關(guān)鍵：每次實(shí)驗(yàn)都必須制作新鮮的標(biāo)準(zhǔn)曲線，且標(biāo)準(zhǔn)品與待測(cè)樣品的基質(zhì)（緩沖液成分）應(yīng)盡可能一致。

2. 控制孵育溫度與時(shí)間：孵育時(shí)間和溫度直接影響顯色深度，需確保所有孔的反應(yīng)條件一致。推薦使用恒溫孵育器而非室溫放置。

3. 樣品顏色干擾：如果樣品本身有顏色，需設(shè)置樣品背景對(duì)照孔（用PBS代替BCA工作液），在最終計(jì)算時(shí)扣除背景值。

4. 數(shù)據(jù)有效性判斷：樣品的吸光度值應(yīng)落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性區(qū)間內(nèi)。若超出范圍，需對(duì)樣品進(jìn)行適當(dāng)稀釋后重新測(cè)定。

四、 典型應(yīng)用場(chǎng)景

1. 蛋白純化過(guò)程監(jiān)控：快速測(cè)定洗脫組分中的蛋白濃度，繪制純化圖譜。

2. 細(xì)胞與組織裂解液定量：為Western Blot等實(shí)驗(yàn)進(jìn)行上樣量均一化。

3. 抗體濃度測(cè)定：用于雜交瘤上清或純化后抗體的初步定量。

4. 藥物研發(fā)與質(zhì)量控制：在生物制藥工藝中監(jiān)測(cè)蛋白表達(dá)量與產(chǎn)物濃度。

賽默飛代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司，提供賽默飛BCA蛋白定量試劑盒等產(chǎn)品。

北京百奧創(chuàng)新科技有限公司是中關(guān)村高新技術(shù)企業(yè)，于2017年在北京成立。百奧創(chuàng)新在產(chǎn)品自主研發(fā)的同時(shí)，也與全球多家生命科學(xué)試劑供應(yīng)商建立良好的合作關(guān)系，基于“客戶第一”的核心理念，向全國(guó)10000+客戶提供200000+優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。公司以北京運(yùn)營(yíng)中心為主體，在天津、上海、浙江、江蘇、廣州、深圳、武漢、成都、重慶等地建立辦事處及聯(lián)絡(luò)中心，并建有北京、天津、深圳三大專業(yè)化庫(kù)存與物流基地，以更好地服務(wù)全國(guó)客戶。